Regulament pentru dezghețarea celulelor
- Decongelați rapid celulele înghețate (< 1 minut) într-o baie de apă la 37°C.
- Diluați încet celulele dezghețate înainte de a le incuba, folosind mediu de creștere preîncălzit.
- Placă celulele dezghețate la densitate mare pentru a optimiza recuperarea.
- Folosiți întotdeauna tehnica aseptică adecvată și lucrați într-o hotă cu flux laminar.
De ce se face dezghețarea celulelor?
Este vital să dezghețați corect celulele pentru a menține viabilitatea culturii și pentru a permite culturii să se recupereze mai rapid. Unii crioprotectori, cum ar fi DMSO, sunt toxici peste 4 °C. Prin urmare, este esențial ca culturile să fie dezghețate rapid și diluate în mediu de cultură pentru a minimiza efectele toxice.
Care este procesul de decongelare?
Decongelarea este procesul de luare a unui produs congelat de la congelat la o temperatură (de obicei peste 0°C) în care nu există gheață reziduală, adică „decongelare”. Dezghețarea este adesea considerată ca o simplă inversare a procesului de congelare.
Care este cel mai bun mod de a îngheța celulele?
Congelați încet celulele reducând temperatura la aproximativ 1°C pe minut folosind un crio-congelator cu viteză controlată sau un recipient de crio-congelare, cum ar fi „Mr. Frosty”, disponibil de la Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Utilizați întotdeauna mediul de congelare recomandat.
Cum dezghețați o celulă primară?
Ștergeți exteriorul flaconului de celule cu 70% etanol sau izopropanol. Într-un dulap de biosecuritate, răsuciți capacul un sfert de tură pentru a elibera presiunea internă și apoi strângeți din nou. Dezghețați rapid celulele într-o baie de apă la 37°C rotind ușor flaconul. Scoateți flaconul când rămâne o cantitate mică de gheață.
