Logo ro.boatexistence.com

Cum se reduce colorarea de fundal în imunofluorescență?

Cuprins:

Cum se reduce colorarea de fundal în imunofluorescență?
Cum se reduce colorarea de fundal în imunofluorescență?

Video: Cum se reduce colorarea de fundal în imunofluorescență?

Video: Cum se reduce colorarea de fundal în imunofluorescență?
Video: Quantification of Immunohistochemistry images using ImageJ | How to remove background in ImageJ 2024, Mai
Anonim

Pentru a reduce legarea de anticorpi nespecifici și, în consecință, pentru a reduce semnalul de fundal, se recomandă să folosiți o soluție de blocare înainte de incubarea cu anticorpi Cea mai eficientă soluție de blocare va fie cel care conține ser din aceeași specie în care a fost crescut anticorpul secundar.

Cum previi petele de fundal?

Scăderea grosimii secțiunilor de țesut poate ajuta la reducerea colorării de fundal. Încercați să tăiați secțiuni mai subțiri pentru un IHC mai curat. De asemenea, este important să aveți grijă să nu lăsați secțiunile să se usuce, deoarece uscarea poate duce la o colorare nespecifică ridicată.

Cum optimizați imunofluorescența?

Microscopie cu imunofluorescență: 10 sfaturi tehnice pentru succes

  1. Fixarea și permeabilizarea celulelor. …
  2. Specificitatea anticorpilor. …
  3. Folosind diluția adecvată de anticorpi. …
  4. Optimizarea tampoanelor și agenților de blocare. …
  5. Utilizarea unei densități celulare adecvate. …
  6. Cotații multiple. …
  7. Anticorpi secundari. …
  8. Reducerea fundalului.

Ce cauzează colorarea fundalului?

Patarea de fundal poate fi cauzată de legarea inadecvată a anticorpilor sau de greșeli în timpul pregătirii lamei de țesut.

Anticorpii secundari reduc semnalele de fundal?

Anticorpii secundari specifici

F(ab) pot ajuta la reducerea semnalului de fundal prin eliminând legarea nespecifică a proteinele IgG găsite în țesuturi de către anticorpul secundar.

Recomandat: