Logo ro.boatexistence.com

Cum se face imunofluorescența?

Cuprins:

Cum se face imunofluorescența?
Cum se face imunofluorescența?

Video: Cum se face imunofluorescența?

Video: Cum se face imunofluorescența?
Video: Immunofluorescence 2024, Mai
Anonim

Următorul este o prezentare generală a diferiților pași ai unui protocol de colorare indirectă cu imunofluorescență

  1. Planificarea experimentului și pregătirea mostrelor. …
  2. Sample Fixation. …
  3. Permeabilizare celulară. …
  4. Blocare. …
  5. Incubarea cu anticorpi primari. …
  6. Incubare secundară cu anticorpi. …
  7. Contrasă și montaj.

Cum se efectuează imunofluorescența?

Toți pașii de incubare au loc la temperatura camerei

  1. Spălați celulele de două ori și folosiți o pensetă pentru a plasa cu grijă lama cu celulele răsturnate în camera umidificată.
  2. Reparați cu 4 % formaldehidă timp de 10 minute și spălați 3 ×.
  3. Permeabilizați cu 0,1 % TX-100/PBS timp de 15–20 de minute și spălați 3 ×.

Cum folosiți imunofluorescența într-o celulă?

Protocol de imunofluorescență pentru celulele aderente

  1. Sămânță 1–1,5 x104 celule per godeu dintr-o lamă cu 4 camere în 500 ml de mediu de cultură. Incubați la 37°C la 5% CO2.
  2. 32–36 de ore după însămânțarea celulelor, îndepărtați mediul de cultură celulară și clătiți celulele de 3 ori folosind 500 µL de 1X PBS.

Care este un exemplu de imunofluorescență?

De exemplu, un cercetător ar putea crea anticorpi primari la o capră care recunosc mai multe antigene și apoi să folosească anticorpi secundari de iepure cuplați cu colorant care recunosc regiunea constantă a anticorpilor de capră ( anticorpi anti-capră de iepure).

La ce folosește colorarea prin imunofluorescență?

Cotația cu imunofluorescență (IF) este o tehnică folosită în cercetarea biologică și diagnosticarea clinică IF utilizează anticorpi marcați cu fluorescent pentru a detecta antigene țintă specifice. Urmat de imagini, este o tehnică foarte directă, deoarece puteți vedea ceva.

Recomandat: