Testul
Complementarea fluorescenței bimoleculare (BiFC) este o metodă utilizată pentru a vizualiza direct interacțiunea proteină-proteină in vivo folosindimagistica cu celule vii sau celule fixe. … BiFC a fost descris pentru prima dată de Hu și colab.
Cum funcționează complementarea fluorescenței bimoleculare?
Principiul de lucru al BiFC se bazează pe dezvoltarea unui complex fluorescent, ca urmare a asocierii a două segmente ale unei proteine fluorescente atunci când acestea sunt în imediata apropiere datorită interacțiunii proteină-proteină în fragmente, de exemplu., în BiFC, un fluorofor este împărțit în capete terminale amino și carboxil.
Ce este testul BiFC?
Testul
complementarea fluorescenței bimoleculare (BiFC) permite vizualizarea simplă și directă a interacțiunilor proteinelor din celulele vii (45). Abordarea BiFC se bazează pe formarea unui complex fluorescent atunci când două proteine fuzionate cu fragmente nefluorescente ale unei proteine fluorescente interacționează între ele (Fig.
De ce este efectuat testul BiFC?
Ideea BiFC este de a exprima jumătăți de GFP fuzionate cu proteinele dvs. de interes Dacă POI-urile interacționează, puteți aduce ambele jumătăți împreună pentru a obține un GFP funcțional. Deci, dacă există o jumătate de GFP exprimată în celulă, nu sunt surprins că un anticorp GFP o poate detecta.
BiFC este reversibil?
Ireversibilitatea complexelor BiFC a fost bine documentată (10) și se pare că majoritatea, dacă nu toate, sistemele BiFC bazate pe proteine fluorescente sunt ireversibile (8, 33, 43, 48–51).
